人源腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段及其全抗体的研制
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姚李四;王涛;梁米芳;袁振华;纪燕;吴小兵;李德新
依赖病毒|免疫球蛋白类|Fab|RNA噬菌体|杆状病毒科|基因|昆虫,关键词:
参见附件(97kb)。
姚李四;王涛;梁米芳;袁振华;纪燕;吴小兵;李德新 基因工程国家重点试验室;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所出血热与虫媒病毒室 100052北京 中华实验和临床病毒学杂志 2003 3
关键词:依赖病毒;免疫球蛋白类;Fab;RNA噬菌体;杆状病毒科;基因;昆虫
目的 运用噬菌体表面表达技术,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞,提取总RNA ,逆转录cDNA ,聚合酶链反应扩增人IgGFab轻、重链基因,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段,并在E coli中进行分泌性表达。通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体,并进行序列测定。然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC L Fc上,转染昆虫sf 9细胞,利用杆状病毒昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达,免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白。结果 分离到...
关键词:依赖病毒;免疫球蛋白类;Fab;RNA噬菌体;杆状病毒科;基因;昆虫
目的 运用噬菌体表面表达技术,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞,提取总RNA ,逆转录cDNA ,聚合酶链反应扩增人IgGFab轻、重链基因,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段,并在E coli中进行分泌性表达。通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体,并进行序列测定。然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC L Fc上,转染昆虫sf 9细胞,利用杆状病毒昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达,免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白。结果 分离到...
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