甲状腺激素反应蛋白1的原核生物表达

http://www.100md.com 许光武；贾秀娟；谢超；周文中；张迪；谢晓雁；罗敏

甲状腺激素反应蛋白1|蛋白表达,关键词：

    参见附件(29kb)。

     许光武；贾秀娟；谢超；周文中；张迪；谢晓雁；罗敏 上海第二医科大学附属瑞金医院内分泌代谢科；上海市内分泌代谢病研究所；200025 中华内分泌代谢杂志 2003 5

    关键词：甲状腺激素反应蛋白1；蛋白表达

    目的 应用基因工程技术表达甲状腺激素反应蛋白1(TRP 1)。方法 应用RT PCR方法,从新生大鼠脑组织RNA中扩增编码TRP 1的cDNA片段,构建表达型重组质粒,经DNA序列分析确证后,在大肠杆菌中表达,以Western印迹来初步鉴定是否表达了目的融合蛋白,用亲和层析纯化融合目的蛋白,并以SDS PAGE电泳测定其相对分子质量。结果 所获特异PCR产物正确地重组入PinpointXa 1表达载体中。Western印迹表明经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核细胞表达产生了目的融合蛋白,亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约2 3 4 0 0的融合目的蛋白。结论 应用原核细胞表达体系成功地表...

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