抗人巨细胞病毒中和性人源基因工程抗体的研究
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段涛;梁米芳;谷淑燕
巨细胞病毒|细菌噬菌体M13|免疫球蛋白类|抗体|单克隆,关键词:
参见附件(70kb)。
段涛;梁米芳;谷淑燕 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒应急技术中心 100052北京 中华实验和临床病毒学杂志 2003 3
关键词:巨细胞病毒;细菌噬菌体M13;免疫球蛋白类;抗体;单克隆
目的 研究抗人巨细胞病毒(HCMV)人源基因工程抗体。方法 采用噬菌体表面展示技术,首先从HCMV感染者外周血中分离淋巴细胞,提取RNA ,逆转录后用特异性引物扩增轻、重链基因,然后插入噬菌体载体pComb3,构建噬菌体抗体库。使用纯化的HCMV病毒裂解物对噬菌体抗体库进行4轮富集,然后通过ELISA筛选阳性克隆,并对获得的克隆进行功能鉴定。结果 克隆和表达了3株抗HCMV人源Fab抗体,经ELISA证明均具有抗原结合活性,间接免疫荧光试验证明具有较高的特异性,最后通过病毒中和试验证明其中2株具有中和活性。结论 获得2株抗HCMV人源Fab抗体,具有一定的中和活性,为...
关键词:巨细胞病毒;细菌噬菌体M13;免疫球蛋白类;抗体;单克隆
目的 研究抗人巨细胞病毒(HCMV)人源基因工程抗体。方法 采用噬菌体表面展示技术,首先从HCMV感染者外周血中分离淋巴细胞,提取RNA ,逆转录后用特异性引物扩增轻、重链基因,然后插入噬菌体载体pComb3,构建噬菌体抗体库。使用纯化的HCMV病毒裂解物对噬菌体抗体库进行4轮富集,然后通过ELISA筛选阳性克隆,并对获得的克隆进行功能鉴定。结果 克隆和表达了3株抗HCMV人源Fab抗体,经ELISA证明均具有抗原结合活性,间接免疫荧光试验证明具有较高的特异性,最后通过病毒中和试验证明其中2株具有中和活性。结论 获得2株抗HCMV人源Fab抗体,具有一定的中和活性,为...
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