单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的制备
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许静；刘俊霞；李侠；宋增璇
单链抗体|碱性磷酸酶|融合蛋白,关键词：
参见附件(37kb)。
许静；刘俊霞；李侠；宋增璇 中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室 天津300020 中国免疫学杂志 2003 10
关键词：单链抗体；碱性磷酸酶；融合蛋白
目的:制备单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白。方法:把碱性磷酸酶编码区插入pSTE2 8E5质粒DNA ,用scFvC6 6的重链和轻链可变区DNA取代scFv 8E5的重链和轻链可变区DNA ,构成表达载体pSTE2 C6 6 Ap在大肠杆菌中表达,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法分析产物活性。结果:获得一个分子量为75kD的scFvC6 6 Ap融合蛋白,可结合来自KG1a细胞裂解物中的一个分子量约6 0kD的蛋白质带,其结合功能可通过其碱性磷酸酶活性直接测定。结论:建立了一个用大肠杆菌制备单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白的方法,它可能取代常规的碱性磷酸酶标记方法而用于免疫检测。
关键词：单链抗体；碱性磷酸酶；融合蛋白
目的:制备单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白。方法:把碱性磷酸酶编码区插入pSTE2 8E5质粒DNA ,用scFvC6 6的重链和轻链可变区DNA取代scFv 8E5的重链和轻链可变区DNA ,构成表达载体pSTE2 C6 6 Ap在大肠杆菌中表达,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法分析产物活性。结果:获得一个分子量为75kD的scFvC6 6 Ap融合蛋白,可结合来自KG1a细胞裂解物中的一个分子量约6 0kD的蛋白质带,其结合功能可通过其碱性磷酸酶活性直接测定。结论:建立了一个用大肠杆菌制备单链抗体碱性磷酸酶融合蛋白的方法,它可能取代常规的碱性磷酸酶标记方法而用于免疫检测。
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