柯萨奇B1病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达
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赵铁强；钟照华；田野；韩福生；梁瑛娟；谷淑燕；皮国华；孟繁超
柯萨奇病毒B|基因,病毒|大肠杆菌|原核表达,关键词：
参见附件(91kb)。
赵铁强；钟照华；田野；韩福生；梁瑛娟；谷淑燕；皮国华；孟繁超 哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科；哈尔滨医科大学微生物学教研室 中国地方病学杂志 2002 1
关键词：柯萨奇病毒B；基因,病毒；大肠杆菌；原核表达
目的 在大肠杆菌中表达柯萨奇 B1(CVB1)病毒 VP1蛋白。方法 用限制性酶切方法将 CVB1VP1基因从 p MD18-T-VP1上切下 ,连接至 p QE3 0构建原核表达系统 p QE3 0 -VP1。经酶切和 PCR验证后转化至大肠杆菌 BL2 1(DE3 ) ,用 IPTG诱导目的基因表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western-blot检测 VP1蛋白的表达。结果 酶切、PCR证明构建的原核表达系统携带方向正确的 CVB1VP1基因。SDS-PAGE和 Western-blot实验均可于 3 3 .0 k Da处见到目的条带。结论 CVB1VP1基因在大肠杆菌的成功表达为开发新的血清学检测试剂提供了基础.
关键词：柯萨奇病毒B；基因,病毒；大肠杆菌；原核表达
目的 在大肠杆菌中表达柯萨奇 B1(CVB1)病毒 VP1蛋白。方法 用限制性酶切方法将 CVB1VP1基因从 p MD18-T-VP1上切下 ,连接至 p QE3 0构建原核表达系统 p QE3 0 -VP1。经酶切和 PCR验证后转化至大肠杆菌 BL2 1(DE3 ) ,用 IPTG诱导目的基因表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western-blot检测 VP1蛋白的表达。结果 酶切、PCR证明构建的原核表达系统携带方向正确的 CVB1VP1基因。SDS-PAGE和 Western-blot实验均可于 3 3 .0 k Da处见到目的条带。结论 CVB1VP1基因在大肠杆菌的成功表达为开发新的血清学检测试剂提供了基础.
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