人β地中海贫血IVSⅡ654(C→T)突变基因的克隆和真核表达体系的构建
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段山；方小武；陈路明；曾瑞萍；杜传书
贫血|珠蛋白生成障碍性|βIVSII654突变基因|基因疗法|白血病|幼红细胞|急性,关键词：
参见附件(67kb)。
段山；方小武；陈路明；曾瑞萍；杜传书 中山大学中山医学院医学遗传学教研室 广东广州510089 中国病理生理杂志 2003 1
关键词：贫血；珠蛋白生成障碍性；βIVSII654突变基因；基因疗法；白血病；幼红细胞；急性
目的 :克隆人 β地中海贫血IVSII654突变基因 ,构建该致病基因的体外真核表达体系。为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法 :抽提 β 654纯合子患者DNA进行PCR扩增 ,将其克隆到pBGT51质粒中 ,然后将人 β珠蛋白基因座控制区 (LCR)及 β654基因亚克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3 .1 +中。脂质体转染至小鼠红白血病细胞 (MEL) ,DMSO诱导MEL细胞表达 ,逆转录PCR检测人 β 654基因在MEL中的表达。 结果 :成功构建了几乎真实模拟人体内 β 654基因调控的真核表达系统。 结论 :β 654基因在MEL细胞中的表达情况同人体内 β654基因的表达完全一致 ,为该病的基...
关键词：贫血；珠蛋白生成障碍性；βIVSII654突变基因；基因疗法；白血病；幼红细胞；急性
目的 :克隆人 β地中海贫血IVSII654突变基因 ,构建该致病基因的体外真核表达体系。为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法 :抽提 β 654纯合子患者DNA进行PCR扩增 ,将其克隆到pBGT51质粒中 ,然后将人 β珠蛋白基因座控制区 (LCR)及 β654基因亚克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3 .1 +中。脂质体转染至小鼠红白血病细胞 (MEL) ,DMSO诱导MEL细胞表达 ,逆转录PCR检测人 β 654基因在MEL中的表达。 结果 :成功构建了几乎真实模拟人体内 β 654基因调控的真核表达系统。 结论 :β 654基因在MEL细胞中的表达情况同人体内 β654基因的表达完全一致 ,为该病的基...
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