TLR-4信号转导通路介导层流切应力诱导血管内皮细胞IL-8基因表达的研究
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梁峰；黄宁；王伯瑶；陈槐卿
白细胞介素-8|基因表达|内皮细胞|信号传递,关键词：
参见附件(174kb)。
梁峰；黄宁；王伯瑶；陈槐卿 四川大学华西医学中心生物医学工程研究室 四川成都610041 中国病理生理杂志 2003 1
关键词：白细胞介素-8；基因表达；内皮细胞；信号传递
目的 :观察TLR - 4信号转导通路在层流低切应力诱导血管内皮细胞IL - 8基因表达中的作用。方法 :设计突变引物 ,用RT -PCR技术从血管内皮细胞扩增出胞内区段缺失突变TLR4cDNA ,用PCR技术从其DNA中扩增出IL - 8上游调控序列 (IL - 8USCS) ,分别克隆于真核表达质粒pcDNA3及绿色荧光增强蛋白报告基因pEGFP1质粒 ,构建出重组TLR - 4缺失突变基因真核表达质粒pcDNA3 -mTLR4和IL - 8报告基因表达质粒pEGFP1-IL8USCS。用pEGFP1 -IL8USCS转染或pcDNA3 -mTLR4和pEGFP1 -IL8USCS共转染ECV30 4细胞 ,用 4 2dyne/cm2 层流切应力刺激 3h ,流式细胞仪观察荧光蛋白表达.
关键词：白细胞介素-8；基因表达；内皮细胞；信号传递
目的 :观察TLR - 4信号转导通路在层流低切应力诱导血管内皮细胞IL - 8基因表达中的作用。方法 :设计突变引物 ,用RT -PCR技术从血管内皮细胞扩增出胞内区段缺失突变TLR4cDNA ,用PCR技术从其DNA中扩增出IL - 8上游调控序列 (IL - 8USCS) ,分别克隆于真核表达质粒pcDNA3及绿色荧光增强蛋白报告基因pEGFP1质粒 ,构建出重组TLR - 4缺失突变基因真核表达质粒pcDNA3 -mTLR4和IL - 8报告基因表达质粒pEGFP1-IL8USCS。用pEGFP1 -IL8USCS转染或pcDNA3 -mTLR4和pEGFP1 -IL8USCS共转染ECV30 4细胞 ,用 4 2dyne/cm2 层流切应力刺激 3h ,流式细胞仪观察荧光蛋白表达.
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