 |
关键词：ELISA；广州管圆线虫
广州管圆线虫是一种寄生在东风螺内，引起人兽共患寄生虫病的线虫。人类通过食用(生食或半生食)或反复接触东风螺(含第三期幼虫)而获得感染。临床主要表现为嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎，从脑脊液中找到虫体为此病的确诊依据，但虫体检出率极低[2～4] 。国内外报道[5] 用ELISA检测实验感染动物的血清抗体获得了满意效果。我们用ELISA对温州市疑为广州管圆线虫感染的患者血清抗体进行了实验研究，现报告如下。
1 材料
1.1 抗原 广州管圆线虫抗原(Angiostrongylus cantonensisantigen)由日本宫崎医学院Kentaro Yoshimura教授制备提供。
1.2 标本来源 1997年10月温州市疑为广州管圆线虫病(嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎)患者血清22份作为病人组，一个月后复查10份血清作为复查组。日本宫崎医学院提供的阴性血清和温州医学院学生健康血清共40份作为对照组。
1.3 酶结合物 辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG由华美生物工程公司提供。
1.4 底物溶物和固相载体 用3，3′，5，5′-四甲基联苯胺(TMB)配制显色液，聚苯乙烯凹孔酶标板为固相载体，由温州市鹿城倍可特生物实验材料厂提供。
2 方法
操作程序参照文献[1] 进行。用包被液将抗原稀释成10 μ g/ml，每孔50μ l加入固相载体内，4℃过夜。PBST洗板3次，拍干，每孔加2%小牛血清200μ l 37℃ 2 h封闭，洗板1次，拍干。用PBST将血清1∶200稀释，每孔50μl 37℃ 1 h，洗板4次，拍干。每孔加HRP-IgG(1∶1 000)50 μ l 37℃ 1 h，洗板4次，拍干。每孔加显色液50μ l，37℃ 15 min，加2 mol/L硫酸终止，450 nm波长比色测定结果。
3 结果
使用ELISA测定3组血清抗体，结果见表1。
表1 血清中广州管圆线虫抗体的ELISA吸光度
| n | s | ||
| 病人组(住院期) | 22 | 1.1110 | 0.5311 |
| 复查组(1个月后) | 10 | 1.0448 | 0.4828 |
| 对照组 | 40 | 0.4982 | 0.1343 |
4 讨论
本文实验结果显示，病人组的虫体抗体明显高于正常人群，可区分感染人群和未感染人群，用于临床的诊断。由于检测抗体是IgG，在人体内存留时间长，因而一个月后的复查组抗体水平与急性期的抗体水平无明显差异。因此，用ELISA检测广州管圆线虫的IgG抗体适用于人群中该虫的感染情况的调查。
参考文献
1 王毓三，叶应妩主编.全国临床检验操作规程.第二版.南京∶东南大学出版社，1997.339～341
2 Cross J H.Studies on Angiostrongyliasis in Eastern Asia and Australia. Taipei, Taiwn∶L-CPublishing Company,1979.57～73
3 何竞智，朱师晦，杨思齐，等.广州管圆线虫在我国大陆人群病例的脑脊髓液中首次发现和证实.广州医学院学报，1984，12(3)∶3～4
4 常正山，蒋则孝，倪秀君，等.在患者脑脊液中同时查见广州管圆线虫第Ⅴ期幼虫与发育期雌性成虫.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1997，15(5)∶285～287
5 伍金满，朱佩娴，戚锡亮，等.用PVC-ELISA法检测实验大鼠广州管圆线虫抗体.中国人兽共患病杂志，1991，7(4)∶15～17
(1998-05-13收稿，1998-08-15修回) , 百拇医药