改良EMSA法分析人α1(Ⅰ)胶原基因序列特异性DNA结合蛋白
基因,胶原|DNA结合蛋白|电泳迁移率改变分析,关键词:
关键词:基因,胶原;DNA结合蛋白;电泳迁移率改变分析
[摘要] 目的:分析人α1(Ⅰ)胶原基因5′侧翼区具有较高启动调控活性序列的DNA结合蛋白。方法:以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞,采用限制性内切酶消化、DNA混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验(EMSA)分析人α1(Ⅰ)胶原基因5′侧翼区-268~+42 bp序列DNA结合蛋白。结果:在胶原产生细胞——人瘢痕成纤维细胞中存在α1(Ⅰ)胶原基因-268~+42bp序列的DNA结合蛋白,其结合活性具有特异性,并能被Sp-1,NF-1,NF-κB识别序列所竞争。结论:改良EMSA法可用于分析较长序列的DNA结合蛋白,人α1(Ⅰ)胶原基因-268~+42bp序列中存在转录因子Sp-1,NF-1,NF-κB结合序列,这些转录因子结合位点可能与人α1(Ⅰ)胶原基因-268~+42bp序列的高启动活性有关。
[中图分类号] Q 753 [文献标识码] A
[文章编号] 0258-879X(2000)08-0708-03
Analysisof sequence-specific DNA-binding protein of human α 1(Ⅰ) procollagen gene with improved EMSA
GAO Chun-Fang LI De-Yan WU Yan-An WANG Hao KONG Xian-Tao
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