微量溶菌酶比色测定法在肾病临床诊断中的意义
关键词：
溶菌酶是一种低分子量不耐热的碱性蛋白，健康人尿中含量极微；当肾小管损伤，肾小球滤过的溶菌酶不能被肾小管重吸收，尿中含量增高，常规的比浊法和平板法灵敏度较低，重复性较差，我们用光电比色法检测；发现该方法操作简单，结果可靠；稳定；可作为肾小管功能缺陷一项参考指标。
对象和方法
1.对象：健康人61例，选用我院学生和部分工作人员。肾病患者40例，选自附属甘泉医院肾内科。
2.方法：参考复旦大学生化教研室溶菌酶比色测定法，取待测样品0.5ml,溶于微球菌染色菌液1.0 ml，混匀，37℃水浴，加终止液，离心，取上清比色，根据测定管与样品对照管吸光度差值，查标准曲线，得溶菌酶含量。
结果
(1) 测440～640 nm吸收光谱，定520 nm为最适波长；(2)定浓度低，反应大的0.4%染色菌体为最适菌体浓度；(3)比色液放置室温1小时，结果未见明显差异；(4)反应时间影响，结果见表1，定3h为最适时间；(5)61例健康人，男性：(0.2±0.16) μg/ml；女性(0.5±0.27) μg/ml，其中一例为3～4μg/ml,尿β2 -m为0.187 μg/ml；(6)40例肾病患者(慢性肾功能衰竭，慢性肾炎，隐匿性肾小球肾炎、原发性高血压病，狼疮肾炎，糖尿病肾病，IgA肾病)尿溶菌酶含量和其它生化指标(血尿素氮，血肌酐，血β2 -m，尿β2 -m)比较，无显著性差异。
表1 反应时间对实验结果的影响
| 时间(h) | 对照管吸光度 | 溶菌酶吸光度 | ||||||
| 1.0μg/ml | 2.0μg/ml | 4.0μg/ml | 6.0μg/ml | 8.0μg/ml | 10.0μg/ml | 30.0μg/ml | ||
| 1 | 0.004 | 0.075 | 0.108 | 0.183 | 0.315 | 0.457 | 0.511 | 0.908 |
| 3 | 0.011 | 0.085 | 0.184 | 0.338 | 0.624 | 0.853 | 0.958 | 1.702 |
| 7 | 0.020 | 0.235 | 0.618 | 0.989 | 1.375 | 1.459 | 1.699 | 1.895 |
| 18 | 0.027 | 0.297 | 1.051 | 1.624 | 1.625 | 1.626 | 1.733 | 1.910 |
讨论
我们测定了61例健康人；40例肾病患者尿溶菌酶含量，发现健康人中一例明显高于正常值，尿β2 -m也异常，其余60人均在正常范围，女性明显高于男性。肾病患者中溶菌酶含量变化和其它生化指标含量升高有平行关系，个别病例尿β2 -m阳性，溶菌酶阴性，说明前者更为敏感。但放免测定需一定设备和条件，而微量溶菌酶比色测定法操作简单，适用于基层。
本课题受上海铁道大学自选科研基金资助
(收稿：1998-12-20)
, 百拇医药