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编号:10670900
内在核糖体进入位点控制多药耐药基因mdr1表达的研究
http://www.100md.com 《中华血液学杂志》 1998年第12期
抗药性,多药|逆转录病毒|基因,mdr1|基因表达,关键词:
     傅建新 陈子兴 王玮 岑建农 阮长耿 215006 苏州医学院附属第一医院、江苏省血液研究所 中华血液学杂志 1998 12 19 12


    关键词:抗药性,多药;逆转录病毒;基因,mdr1;基因表达 期刊 zhxyxzz 0 论 著 fur -->


    

摘要 目的 :观察内在核糖体进入位点(IRES)控制多药耐药基因mdr1的表达能力。方法 :以帽依赖性Hamdr1载体为对照,利用pSXLC/pHa系统构建依赖脑心肌炎病毒IRES翻译的逆转录病毒载体Ha-IRES-mdr1(HaImdr1),脂质体转染法导入鼠源包装细胞GP+E86并获得长春新碱耐药细胞;用聚合酶链反应(PCR)与流式细胞术(FCM)检测mdr1基因的转移与表达。结果 :病毒生产细胞GP+E86/HaImdr1上清中逆转录病毒的滴度为2.0×105 cfu/ml,对长春新碱、柔红霉素与紫杉醇产生交叉耐药(24~52倍),而且具有多药耐药表型。PCR证实mdr1基因已稳定整合至GP+E86/HaImdr1细胞基因组;FCM分析表明IRES能引导mdr1基因翻译成P-糖蛋白而高效表达,程度略低于Hamdr1对照。结论 :IRES可引导mdr1基因进行有效的帽非依赖性翻译,mdr1基因在双顺反子载体中可作为显性选择性基因用于基因治疗。

    Efficient expression of multidrug resistance gene mdr1 in retroviral vector undercontrol of an internal ribosome entry site Fu Jianxin, Chen Zixing, Wang Wei,et al. Jiangsu Institute of Hematology, First Affiliated Hospital of Suzhou MedicalCollege ,Suzhou 215006

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