HSV-TK基因导入正常人T淋巴细胞的实验研究
关键词:
我们利用逆转录病毒介导的基因转染方法将含有自杀基因HSV-TK与潮霉素抗性基因Hy的融合基因HyTK导入正常人T淋巴细胞,以期利用自杀基因的作用底物来减少受者体内供者T细胞的数量,从而达到防治移植物抗宿主病(GVHD)而保留移植物抗白血病(GVL)的目的。为探索一种有效的、更切合实际的预防GVHD的方案提供实验基础。
材料和方法
1 产逆转录病毒的包装细胞PA317/HyTK的建立 利用脂质体将含HyTK基因的逆转录病毒载体PL(HyTK)SN(本室构建)导入PA317细胞中,培养体系中加入潮霉素(HygromycinB,宝灵曼公司)200 μg/ml进行筛选,获得抗性克隆,扩增后进行鉴定,提高潮霉素的浓度加压培养 ......
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