储海燕 王鸿利 王学锋 王振义 储海燕 王鸿利 王学锋 王振义 200025 上海第二医科大学附属瑞金医院、上海血液学研究所 中华血液学杂志 1999 0 20 9


    关键词： 期刊 zhxyxzz 0 方法介绍 fur -->


    

α₂ 抗纤溶酶(α₂ PI)和α₂ 抗纤溶酶-纤溶酶复合物(PAP)的改变与血栓性疾病^[1] 、DIC、恶性肿瘤等许多疾病相关联，这两个指标的检测对于了解血液系统的纤溶改变有重要意义。我们建立了这两个指标的检测方法，并对它们的特异性、敏感性等进行了探讨。

材料和方法

1 辣根过氧化物酶(HRP)为Sigma公司产品，纯化的α₂ PI蛋白、兔抗人纤溶酶原多抗为法国Stago公司产品，PAP复合物标准品为日本Aoki教授惠赠。

    2 单克隆抗体(单抗)的制备 按常规方法。

    3 鉴定单抗抗原结合位点采用Western blot技术。

    4 单抗对抗原活性的影响 单抗与抗原于37℃共温育30分钟，4℃过夜，离心取上清液发色底物法检测抗原α₂ PI抑制纤溶酶的活性。

    5 双抗体夹心法检测α₂ PI的方法建立

    将抗α₂ PI单抗CH-2用包被液(pH 9.6,0.05mmol/L碳酸盐缓冲液)稀释至5μg/ml包板 ......