急性白血病患者和白血病细胞系的bcl-2及bax基因表达
关键词:
为了进一步研究bcl-2和bax基因在急性白血病(AL)发病和治疗中的作用,我们检测了AL患者36例和白血病细胞系6株的bcl-2基因表达,现报告如下。
对象和方法
1 病例资料 AL36例均为我科住院患者。男26例,女10例,均符合FAB诊断标准并经免疫分型确诊,除2例外,其余34例检测时骨髓或外周血中原始和幼稚细胞数均>0.6。急性髓系白血病(AML)23例,急性淋巴细胞白血病(ALL)13例。初治22例,复发或难治14例。白血病细胞系HL-60、U937、Raji、KG1、CEM和K562由军事医学科学院基础医学研究所提供。正常骨髓3份取自骨髓移植正常供髓员。
2 标本制备 取白血病患者骨髓,肝素抗凝,一部分用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,另一部分离心甩片,封存在-20℃冰箱中备用。
3 原位杂交 bcl-2和bax基因探针由军事医学科学院基础医学研究所韩笛博士提供。将560bp的bcl-2cDNA探针和469bp的baxcDNA探针用光敏生物素标记后参照我室的方法[1] 作原位杂交。结果判定:每片计数200个细胞并计算阳性细胞百分率。阴性对照:①空白对照:用无关探针作原位杂交;②以RNase消化掉白血病细胞的RNA后再作原位杂交;③用不含bcl-2mRNA的K562细胞作原位杂交 ......
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