幽门螺杆菌毒素对胃粘膜细胞系c-met, c-myc基因表达的影响
关键词:
幽门螺杆菌感染与胃癌的发生有密切的关系[1] 。Hp在胃癌这一发展过程中的作用是在其早期阶段,长期感染的结果将导致胃粘膜的萎缩、肠化生、异型增生,最终可能导致胃癌的发生[2] 。本研究选择了在胃癌早期即有变异的c-met、c-myc原癌基因,利用体外细胞培养的方法研究Hp培养上清对胃粘膜细胞系GES-l作用后c-met、c-myc的表达,从这一方面研究Hp的致病机制。
材料与方法
一、Hp浓缩的培养上清液(CCS)制备
NCTC11637按1×107 /CFU接种于装有200ml培养基的组织培养瓶中,旋松瓶盖,置于37℃,CO2 浓度为8%。2小时后,旋紧瓶盖,于37℃摇菌3~4天,培养基于4℃ 8 000rpm离心15分钟,保留上清,滴加等体积的50%饱和硫酸铵4℃过夜。再以12 000rpm 4℃离心15分钟,沉淀用PBS溶解至原体积的1/10 ......
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