人肝癌组织中γ-谷氨酰转移酶异常表达及其基因甲基化程度的研究
肝癌|γ-谷氨酰转移酶|基因|表达|RNA|甲基化,关键词:
关键词:肝癌;γ-谷氨酰转移酶;基因;表达;RNA;甲基化
【摘要】 目的 探讨γ-谷氨酰转移酶(GGT)基因在人类肝癌发生过程中的表达及改变机制。方法 以病理组织学、生物化学和分子生物学方法,将自身配对的肝癌、癌旁组织和远癌组织中总RNA纯化,对GGT的表达与改变进行了分析;并设计两套引物,以逆转录巢式PCR法扩增GGT5′-非编码区(NC)基因和限制性内切酶消化分析了不同肝癌组织中GGT基因的甲基化程度。结果 在病理组织学证实的24例肝癌、癌旁和远癌组织中:①从肝癌灶至远癌的不同组织中,总RNA浓度呈逐步升高趋势,三种不同组织间的差异均有显著性(P<0.05);②癌组织中总GGT比活性(U/g)较癌周和远癌组织明显升高(P<0.05);③以自行设计建立的逆转录巢式PCR法,成功地扩增GGT的5′-NC基因片段,特异性强且区带清晰,PCR产物经酶切分析证明,GGT基因5′-NC M3位点(CCGG),其内位C在癌灶、癌周和远癌组织中的低甲基化频率分别为70.83%,58.33%和54.17%,非常明显地高于同组中已甲基化程度。结论 肝癌组织中GGT基因甲基化程度较低,且与肝癌GGT的异常表达关系密切,对肝细胞癌变可能起促进作用。
Abnormal expression and methylation status of γ-glutamyl transferase (GGT) genes in human hepatoma tissue TANG Qiyun, YAO Dengfu, LIU Yanhua, et al. The First Hospital, Yancheng City of Jiangsu Prouince, 224001
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