肝组织切片胶原微量测定法的实验性研究
关键词:
为探讨肝纤维化病理组织量化诊断的方法,根据Lopez-do Leon和Jimenez等报道肝组织切片胶原微量测定方法[1~3] ,采用二硝基亚胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化模型进行系列研究。
材料与方法
一、材料
SD大鼠88只,均由浙江医科大学动物实验中心提供。雌雄各半,体重200±20g,按10mg/kg体重1%DMN(生理盐水稀释)进行腹腔注射共10次。其中第1周连续3次,第2、3、4周各1次,第6、7周各连续2次,于1、3、4、5、6、7和8周随机处死1组,取其肝脏和血清。
二、方法
(一)组织学检查:肝脏组织常规石蜡切片,HE染色、Masson三色染色和苦味酸-天狼红(picric acid-sirus red)染色。按1995年中华医学会传染病与寄生虫病学会修订《病毒性肝炎防治方案》中慢性肝炎分期标准纤维化程度(S)分级。
(二)切片胶原测定:参考Jimenez等[3] 报道的测试方法。即普通石蜡切片,厚15μm,面积30mm2 ~50mm2 ,0.01%固绿-饱和苦味酸(Fast-green FCF-Picric acid),避光室温孵育15分钟 ......
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