肝细胞生长因子及其受体c-met原癌基因在人肝细胞癌中的表达及意义
关键词:
近年,随着对肿瘤转移机制的深入研究,发现一些细胞因子参与并调控了肿瘤细胞的运动[1] 。我们采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-met原癌基因在肝细胞癌中的表达变化规律,以探讨HGF及其受体系统与肝细胞癌浸润转移的关系。
材料和方法
一、实验材料
(一) 人肝细胞癌标本取自1997年4月至1998年2月在江苏省人民医院普外科及江苏省肿瘤医院普外科所接受手术切除并经病理证实为肝细胞癌的患者,共32例,男24例,女8例,平均年龄55岁。5例正常对照肝组织标本取自同期手术的肝血管瘤患者。
(二) 主要试剂:AMV逆转录酶及Taq DNA聚合酶均购自Promega公司。HGF、c-met和β-actin基因三对引物均由上海细胞研究所合成,扩增片段大小分别为389bp、655 bp和206bp,β-actin基因用作内对照扩增。
二、实验方法
(一) 总RNA提取:避开癌症坏死区,切下标本约100mg立即液氮保存,参照Chomczynski等[2] 一步法 ......
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