甲状腺癌P53、K-ras基因序列测定
关键词:
肿瘤发生的分子基础可能与抑癌基因(tumorsuppressor gene)的失活或原癌基因(oncogene)的活化而导致细胞分化不良和增殖失控有关。P53 基因属抑癌基因,其突变的好发部位为外显子5~8。K-ras基因为原癌基因,其突变热点为外显子1~2。本研究采用聚合酶链式反应—测序方法,分析了甲状腺癌P53 基因外显子7、8,K-ras基因外显子1、2的碱基序列。
一、材料与方法
1.组织标本:甲状腺癌标本14例,其中甲状腺乳头状癌10例,甲状腺滤泡状癌4例。
2.试剂:末端标记DNA测序试剂盒,10×分析缓冲液、测序凝胶系美国Perkin-Elmer公司产品。TaqDNA聚合酶、10×扩增缓冲液、dNTP、氯化镁系加拿大Sangon公司产品。电泳用琼脂糖由中科院上海药物所产。引物由中科院上海细胞所合成,其它试剂采用国产分析纯试剂配制而成。
3.仪器:310型DNA测序仪,2400型DNA扩增仪系美国Perkin-Elmer公司产品 ......
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