狂犬病毒单抗重链可变区基因的克隆及在原核细胞中的表达
关键词:
狂犬病是一种烈性传染病,一旦被带狂犬病毒的动物咬伤或抓伤,常规处理是注射狂犬病毒灭活疫苗,但抗体产生较慢,对严重咬伤者影响治疗效果,主张在注射疫苗的同时注射抗狂犬病毒的免疫血清或单克隆抗体。但目前所能获得的上述制剂均来自动物,进入人体后易引起过敏反应[1,2] ,而人的免疫血清及单克隆抗体又相当难获得。因此近年来分子生物学的发展使基因工程抗体得以产生并取得了令人瞩目的成就。自1989年Ward等[3] 成功地克隆并表达了抗裂解酶单抗VH单域抗体后,国内外相继报道了许多这方面成功的例子。我们利用基因工程技术表达的VH单域抗体,是既能中和RV又不含引起人抗鼠免疫反应的抗体。
1 材料和方法
1.1 材料来源 RV及分泌抗RV单克隆抗体的杂交瘤细胞株2F6均由中国预防医学科学院病毒学研究所虫媒研究室提供,辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG购自中国军事医学科学院。抑制型菌株JM109购自美国Promega公司;质粒pUC18购自华美公司;噬菌粒载体pHEN 1由虫媒室提供;辅助噬菌体M13K07购自Promega公司 ......
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