肖瑶 姚均 陈刚 潘品良 邵一鸣 100050 北京 卫生部艾滋病预防与控制中心参比室(肖瑶 陈刚 潘品良 邵一鸣)；同济医科大学微生物教研室(姚均) 中华实验和临床病毒学杂志 1999 0 0 1


    关键词：异源双链泳动分析；人类免疫缺陷病毒Ⅰ型；亚型；质粒；序列分析；敏感性分析 期刊 zhsyhlcbdxzz 0 论著 fur -->


    

【摘要】 目的 构建我国人免疫缺陷病毒1型(HIV-1) B、C 和 E各亚型代表株env基因质粒，用于对中国HIV-1进行分型。方法 将与我国HIV-1 B、C 和 E各亚型共享序列最接近的毒株用套式聚合酶链反应(PCR)技术扩增包膜(env)基因，克隆到 pGEM-Teasy载体中，构建成用于异源双链泳动分析(HMA)分型的中国标准亚型质粒，并进行了序列分析和分型的敏感性分析。结果 构建的中国HIV-1 B、C 和 E亚型标准亚型质粒对我国已知亚型的样品进行分析，有清晰的异源双链带形成，形成的异源双链与国外同种亚型质粒与样品形成的异源双链带相比，距同源双链更为接近，分型结果更为精确。中国HIV-1 B、C 和 E亚型标准株的核苷酸序列与国际常用于HMA分型的TH14、IND868、MA959、TH22、等序列比较,相应亚型的核苷酸同源性是：B亚型90.2%, 88.3%，C亚型 83.7%，E 亚型92.3%。结论 采用HMA方法，用中国HIV-1 B、C 和E 各亚型标准质粒对中国HIV-1进行分型，中国HIV-1代表株的HMA各参考亚型质粒提高了中国HMA分型的敏感性，也为世界卫生组织(WHO)艾滋病规划署(UNAIDS)的HIV分离鉴定网增加了供分型的参考亚型质粒 ......