HBV-Sag特异性靶细胞系的构建
乙型肝炎|靶细胞|细胞免疫,关键词:
关键词:乙型肝炎;靶细胞;细胞免疫
【摘要】 目的 研究特异性细胞免疫反应在病毒性肝炎发生发展中的作用及观察药物等对细胞免疫反应的影响。方法 用DNA重组技术构建逆转录病毒重组质粒PLXSN-S,以电穿孔方法转入PA317细胞,筛选高表达克隆,收集其假病毒颗粒感染EL4 细胞,经有限稀释选择高表达克隆。结果 重组质粒转染PA317细胞后,53个克隆形成(1∶10传代),在24孔板中扩增后有7个克隆细胞上清HBsAg阳性。用HBsAg A值(曾称OD值)最高克隆的假病毒感染EL4细胞,再经有限稀释得到稳定、高效表达HBsAg的靶细胞系(EL4 -S),在体外传100代以上,HBsAg仍能高效表达(48小时上清中HBsAg的A值达0.85)。经检测PLXSN-S及重组腺病毒rAd-B7-2 -S免疫后小鼠对HBsAg特异的细胞免疫反应,得到较为满意的结果。结论 我们成功构建了稳定表达HBsAg的靶细胞,对研究HBsAg细胞免疫反应及乙肝免疫发病机理等方面有重要意义。
Production of HBV surface antigen-specific target cell
ZHOU Zhi ZHANG Dingfeng REN Hong
......
您现在查看是摘要页,全文长 14977 字符。