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关键词：
流式细胞术(FCM)以其快速、敏感、准确、特异的优点被广泛用于临床活化血小板的检测。我们于1996年11月至1999年2月用抗活化血小板单克隆抗体(McAb)作探针，测定了67例老年冠心病患者及32例健康人血小板膜糖蛋白CD63(GP53)、CD62P(GMP140)、凝血酶敏感蛋白(TSD)的变化，以探讨老年人冠心病患者血小板活化程度及临床意义。
一、资料与方法
临床资料：健康对照组32例，均无心脑血管疾病、高血压及糖尿病史，2周内均无服用影响血小板功能药物史，其中男19例，女13例，年龄60～77岁，平均68.1岁。冠心病组67例，均为山东医科大学附属医院住院或门诊病例，男44例，女23例，年龄62～78岁，平均68.3岁；其中不稳定型心绞痛(UA)39例，稳定型心绞痛(SA)11例，心肌梗死17例，均符合1979年WHO制定的缺血性心脏病的诊断标准。
方法：免疫荧光单克隆抗体CD63-异硫氰酸(FITC)，TSD-藻红蛋白(PE)及相应的阴性对照均为法国Immunotech公司产品。CD62P-FITC为美国PharMingen产品。血小板制备：静息状态下采集静脉血，106 mmol/L枸橼酸钠抗凝，分离富含血小板血浆(PRP)，1%多聚甲醛固定15 min，PBS洗涤3次，调整血小板浓度为300×109 /L，实验管加洗涤后固定的血小板悬液50μl，相应的McAb 20 μl。对照管加入鼠IgG-FITC或IgG-PE 20 μl，混匀后避光置室温30min，PBS洗涤2次，加1 ml PBS待测。流式细胞仪为Becton-Dickinson FACS Vantage。激光光源为氩离子激光器，激发波长488nm，利用Cell Quest软件进行资料采集和分析。
二、结果
冠心病患者各型(UA、SA、心肌梗死)间与对照组CD63、CD62P、TSD阳性表达率(%)的比较见表1。3种活化血小板膜抗原表达率差异均有显著性(P<0.001)；冠心病各型间表达水平差异无显著性。
表1 对照组与老年冠心病患者各型间CD63、CD62、TSD
阳性表达率的比较(±s，%)
| 分 组 | 例数 | CD63 | CD62P | TSD |
| 冠心病组 | ||||
| SA | 11 | 3.8±1.3 | 4.6±2.0 | 3.9±2.4 |
| US | 39 | 6.0±3.6 | 5.9±3.6 | 4.7±4.1 |
| 心肌梗死 | 17 | 7.3±4.6 | 6.3±4.3 | 6.0±4.6 |
| 正常对照组 | 32 | 1.0±0.6 | 1.4±0.5 | 1.6±0.6 |
三、讨论
本资料显示，老年冠心病患者活化血小板膜抗原表达明显升高，表明老年冠心病患者体内血小板活化处于亢进状态，这不仅为老年冠心病患者应用抗血小板药物提供了理论依据，而且可用于评价药物治疗的效果。本资料老年冠心病患者3种活化血小板膜抗原表达升高的程度有所不同，其中以CD63、CD62P升高较为明显，其变化的意义仍有待进一步探讨。用FCM检测活化血小板是近年来血栓研究的一项重要技术，应用荧光标记的特异性McAb在FCM上可直接对血小板GMP及其功能改变进行检测，目前CD63、CD62P、TSD已成为血小板活化的重要指标〔1〕 ，为老年人血栓性疾病的诊断、抗血栓药物研究、疾病预后、疗效评估等方面提供了依据。
参考文献
1，Cahill MR, Macey MG,Dawson JR, et al. Platelet surface activation antigen expression at baseline and duringelective angioplasty inpatients with mild to moderate coronary artery disease. BloodCoagul Fibrinolysis, 1996，7:165-168.
(收稿日期：1999-01-04 ) , 百拇医药