不同的样本处理方法对乙型肝炎病毒DNA检测的影响
乙型肝炎病毒|聚合酶链反应|DNA,病毒,关键词:
关键词:乙型肝炎病毒;聚合酶链反应;DNA,病毒
【摘要】 目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)的聚合酶链反应(PCR)常规检测中血清样本的最佳处理方法。方法 分别用不同缓冲液(PBS与TE)对血清进行1:1或1:10稀释,不同浓度去污剂(Triton X-100与NP40)及巯基乙醇处理血清样本,以及用硫氰酸胍-酚-氯仿抽提、蛋白酶K消化、碱裂解、辛酸钠裂解等方法处理血清样本,比较这些方法对PCR法检测血清HBV DNA敏感度的影响,并进行了辛酸钠最适浓度实验。结果 在所比较的18种方法中发现硫氰酸胍-酚-氯抽提法、碱裂解法及辛酸钠法有较高的检测敏感度,而辛酸钠法有更好的重复性,方法最为简便。结论 终浓度30~50mmol/L辛酸钠最适用于PCR法常规检测HBV DNA的血清处理。
Effect of varied sample treatment procedures on detection of hepatitis B virus DNA Wang Huimin,Xie Xiaoqian. Affiliated Hospital of Nantong Medical College,Nantong City,Jiangsu Province 226001
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