【摘要】 目的 为适应临床上需同时检测庚型肝炎病毒(HGV)与丙型肝炎病毒(HCV)感染情况，建立了二重逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及微孔板反向杂交法。方法 根据HCV与HGV基因高度保守区自行设计引物，建立了用二重RT-PCR同时检测HCV与HGV RNA方法，并分别用HCV与HGV特异探针微孔板反向杂交检测PCR产物。结果 PCR产物经测序，HCV与Takamizawa等及Choo等报道的核苷酸同源性分别为93.1%～94.1%与92.5%～93.7%，HGV与Simons等、Linnen等及常锦红等的核苷酸同源性分别为90.7%～92.5%、92.0%～92.1%与94.3%～94.5%。测定敏感度约是单式扩增电泳法的100倍，20次重复测定HCV与HGV的CV值分别为8.9%与9.8%。微孔板杂交NaOH最佳终浓度为0.1～0.15mol/L,最佳杂交时间为30～50分钟。137例血清样本检测表明，在肝炎患者与血透患者HCV单独阳性为13.9%，HGV为5.1%，HCV与HGV同时阳性为5.8%。结论 本文用微孔板杂交酶呈色技术检测HCV与HGV二重RT-PCR产物敏感、特异、快速，重复性良好，无溴乙锭污染，经适当改良可用于半定量测定，有较好推广价值。

    Detection of hepatitis C virus and hepatitis G virus RNA by multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction and microtiter plate reverse hybridization Wang Huimin,Zhang Donglei,Xu Fanqin,et al.Affiliated Hospital of Nantong Medical College,226001

     ......