丙型肝炎病毒基因疫苗构建物的实验研究
肝炎病毒组,丙型|疫苗,合成,关键词:,ExperimentalstudyofimmunizationofmicewithhepatitisCvirusgeneticvaccineconstructs
关键词:肝炎病毒组,丙型;疫苗,合成
【摘要】 目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)基因疫苗诱发小鼠免疫反应,为进一步开展HCV基因疫苗研制奠定基础。方法 将编码HCV-Ⅱ型结构蛋白基因片段插入真核细胞表达载体pCD-SRα1 中,形成基因疫苗构建物pCD-HCV1 。从股四头肌免疫Balb/c小鼠,用ELISA和3 H-TdR掺入法检测免疫鼠抗体反应和外周血单个核细胞(PBMC)对HCV抗原的增殖反应。结果 基 因疫苗pCD-HCV1 (100μg/只)3~4次接种小鼠后(n=12),血清抗体水平达0.71±0.08~0.77±0.06(A值,下同),空载体pCD-SRα1 免疫鼠血清抗体阴性;免疫鼠(n=8)抗体水平达高峰后(0.71),持续检测18周未见下降趋势(0.68±0.06~0.75±0.07);pCD-HCV1 免疫小鼠3个月后,用聚合酶链反应(PCR)仍可从肌肉组织中扩增出特异性HCVcDNA片段;免疫鼠PBMC对HCV合成肽CP9 、基因重组抗原C、E1 刺激后均出现增殖反应,刺激指数(SI)分别为4.07±1.58、3.88±0.70和3.69±1.30,与pCD-SRα1 免疫鼠相比,差异有显著性(P<0.001) ......
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