为探讨哮喘发病中Th1和Th2细胞间功能不平衡的原因及调节机制，本组观察了哮喘发作期患 者外周血淋巴细胞(PBL)白细胞介素(IL)-4、IL-5和γ干扰素(IFN-γ) mRN A表达及分泌水平的变化,并观察体外实验中左旋精氨酸(L-Arg)及N^ω -左旋精氨酸甲酯(L-NAME)对其的影响。

    一、对象与方法

    1.对象：哮喘组：根据1997年全国哮喘会议制订的诊断标准^[1] 诊断的10例哮喘发 作期患者，男女各5例,平均年龄34岁, 均为支气管舒张试验1秒钟用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV ₁ %)>15%或乙酰甲胆碱激发试验阳性,采血前4周停用糖皮质激素及免疫制剂。对照组：健康人10例,男女各5例,平均年龄32岁。

    2.方法：(1)PBL培养上清及细胞涂片制备:无菌采血10ml, 肝素抗凝，常规分离PBL,离心洗涤后,用RPMI-1640培养液调细胞浓度为1×10⁹ /L,接种于24孔培养 板, 每孔1 ml, 均加入终浓度为50 mg/L的植物血凝素(PHA), 并分别加入0.005 mm ol/L 、0.5 mmol/L、1 mmol/L L-NAME和0.1mmol/L、0.5mmol/L、1 mmol/L L-Arg,置于37℃ ,5% C O₂ 孵育箱中培养24小时,收集上清液，置-20℃保存待测；培养细胞用DEPC处理水配制的PBS(p H 7.4,0.01 mol/L)洗涤后,制作细胞涂片冻存于-70℃待测 ......