免疫吸附清除循环TNF-α对内毒素休克时肝损伤的保护作用
关键词:
研究旨在观察应用免疫吸附的方法特异性清除循环肿瘤坏死因子-a(TNF-α)对内毒素休克时肝损害的影响,并探讨其可能的机制。
材料与方法
一、抗TNF-α单克隆抗体亲和免疫吸附柱的制作参见文献[1]。
二、实验动物与分组
新西兰白兔40只,体重2.19±0.21kg,雌雄不限,由第一军医大学南方医院动物所提供。右颈总动脉、左颈外静脉和股动脉插管,股动脉导管与多道生理记录仪相连接以检测注射LPS后3小时内平均动脉压(MAP)的变化。经颈外静脉一次注入自制LPS(E coli O111 B4)8.0× 10 9 cfu/kg后,动物随机分为2组:(1)对照组(n=25):仅观察血压和抽取血样;(2)吸附组(n=15):于注射LPS后1小时开始血液灌流,血液自右颈总动脉引出,流经P-l蠕动泵(Pharmacia-LKB产品)和免疫吸附柱,从左颈外静脉回输体内。血流量5ml/min,持续进行2小时。
三、指标检测
于注射LPS前、注射LPS后1、2、3、6、12、24小时留取血标本,24小时活杀动物,迅速取出肝脏。(1)血浆TNF-α活性:采用L929 细胞毒法测定。 (2)血浆一氧化氮(NO)含量:利用军科院放射医学研究所生产的测试盒 ......
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