王洁 刘叙仪 吴梅娜 蒋薇 吕梅君 王洁 刘叙仪 吴梅娜 蒋薇 100036 北京医科大学临床肿瘤学院 北京肿瘤医院 内二科；吕梅君 上海市肺科医院肿瘤科 中华肿瘤杂志 1999 0 21 6


    关键词：肺肿瘤；A549和A549DDP细胞；细胞凋亡；反义寡核苷酸；药物耐受性；基因表达 期刊 zhzlzz 0 基础研究 fur -->


    

【摘要】 目的 探讨顺铂耐药肺腺癌细胞系A₅₄₉ ^DDP 的耐药、凋亡相关基因的表达及其与亲代细胞A₅₄₉ 的差异，观察差异表达基因的反义寡核苷酸的逆转作用。方法 将人工合成的反义、正义硫代脱氧寡核苷酸(S-oligodleoxynucleotide,S-ODN)经脂质体包裹后转染A₅₄₉ ^DDP 细胞，应用RT-PCR检测耐药及凋亡相关基因mRNA水平，免疫细胞化学及流式细胞-抗体(FCM-Ig)检测相应蛋白及核增殖抗原Ki-67表达，MTT检测其耐药性改变，TUNEL、DNA电泳检测细胞凋亡。结果 A₅₄₉ ^DDP 细胞多药耐药基因(MDR1)、拓朴异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)、c-mycmRNA及蛋白表达水平接近A₅₄₉ ，二者c-erbB-2均阴性。A₅₄₉ ^DDP bcl-2阳性，且MRPmRNA及蛋白水平较A₅₄₉ 高。bcl-2、MRP反义S-ODN可相应地抑制bcl-2、MRP、c-myc表达，降低A₅₄₉ ^DDP 耐药性 ......