HAb25肝癌单克隆抗体可变区基因的克隆和序列测定
癌,肝细胞 抗体,单克隆 基因 克隆,关键词:
关键词:癌,肝细胞 抗体,单克隆 基因 克隆
【摘要 】目的 克隆HAb25肝癌单克隆抗体(McAb)的可变区基因。方法 RT-PCR法从分泌HAb25单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出VH和VL基因,双脱氧链终止法测定其核苷酸序列。结果 VH和VL基因的两端均含有完整的引物序列,VH基因全长360bp,编码120个氨基酸,VL基因全长330bp,编码110个氨基酸,重、轻链可变区内均仅含单一开放读框,具有明显的抗体可变区特征,与基因数据库(GenBank)中的序列进行比较分析,基因库中无相同的基因,VH基因与小鼠重链VH186.2家族同源性最高(84.00%),属小鼠Ig重链可变区9个家族中的第三族,VL基因与小鼠kappa轻链MMIgGKAVAG基因同源性最高(82.00%),属小鼠Igkappa轻链第Ⅳ组。结论 克隆的HAb25 McAb的可变区基因为功能性重排的小鼠可变区基因。
Cloning and sequencing of variable region genesof HAb25 McAb against hepatocellular carcinoma
HU Chuanmin, LIU Yanfang, GAO Lei, et al.
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