关键词：
我们利用原代体外培养大鼠肝细胞观察肝细胞生素(HGF)、胰岛素(Ins)对肝细胞cAMP/cGMP系统的影响。
材料和方法：1. 实验动物 Wistar大鼠，雄性，体重180～200克(军事医学科学院)。2. 试剂IMDM(GIBCO)，Ⅰ型胶原酶，胰岛素及小牛血清(Sigma), 3H-TdR及cAMP、cGMP试剂盒(中国原子能研究院)，HGF[(94)卫生准字]，液体闪烁计数器(BackmanLs9800)。3. 大鼠肝细胞分离和体外培养按Seglen等 [1] 人方法，培养24小时后，换成无小牛血清的IMDM，加入不同浓度的HGF，Ins作用24，48，72小时。4. cAMP、cGMP水平测定按试剂盒说明书操作，肝细胞增殖程度测定按Miyazaki等 [2] 人方法。
结果与讨论：1. 随不同时间变化，肝细胞cAMP、cGMP水平在一相对稳定的平衡状态下保持肝细胞分裂及分化。2. HGF可改变细胞cAMP，cGMP水平，尤以提高cGMP显著，当HGF为160mg/L培养48小时，cAMP/cGMP比值由2.161降为0.3889(P<0.01)。Ins虽可改变肝细胞cAMP、cGMP水平，但对cGMP水平的影响较HGF弱，cAMP/cGMP比值最低为0.5341(P<0.001)。3. HGF，Ins的cAMP/cGMP比值与3H-TdR掺入率呈负相关，且相关系数分别为-0.8275(P<0.001)和-0.6327(P<0.01)。实验结果表明HGF与Ins均可促进cAMP及cGMP水平的提高，以cGMP升高为著，因cAMP具有抑制细胞分裂，促进细胞分化的功能，而cGMP却具有促进细胞分裂，抑制细胞分化功能，提示HGF，Ins影响肝细胞再生与cAMP/cGMP系统平衡改变相关，且cAMP/cGMP比值与 3 H-TdR掺入率呈负相关，cGMP水平提高，导致细胞分裂增强，分化受到抑制，表现肝细胞再生活跃，呈现“返祖”现象。
根据cAMP/cGMP比值的降低程度和与 3 H-TdR相关性分析，HGF促进肝细胞再生能力较Ins强。通过cAMP、cGMP两者平衡，保持肝细胞不同发育阶段的代谢完善过程。
参 考 文 献
1 Selgen.P.O. Preparation ofrat liver cells. Exp.Cell.Res. 1973, 82: 391-404.
2 Miyazak.M. Long-term surival of functunak hepatocytes from adult rat in pressence ofphembarbital in primary culture. Exp.Cell.Res. 1985, 159: 176-190.
(收稿：1997-05-19 修回：1997-11-25)
(本文编辑：金生 校对：袁平戈) , http://www.100md.com