抗HBsAg Fab片段和a-干扰素融合蛋白的克隆及表达
a-干扰素Fab片段HBsAg融合蛋白,抗HBsAgFab片段和a-干扰素融合蛋白的克隆及表达,关键词:
关键词:a-干扰素 Fab片段 HBsAg 融合蛋白
【摘要】 目的 为深入研究乙型肝炎的生物导向治疗,构建以人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体Fab片段为导向作用、aA-干扰素(IFN-aA)为治疗作用的融合蛋白Fab/IFN-aA原核表达载体pHS/IFN-aA。方法 用PCR体外扩增目的基因IFN-aA,并在其DNA两端引入酶切位点及5'端人工合成的Linker,重组人抗HBsAg抗体Fab片段表达载体pHS相应酶切位点,酶切和DNA测序鉴定筛选出阳性克隆,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。结果 目的基因正确正向插入载体,重组表达载体pHS/IFN-aA能在大肠杆菌表达出具有双重生物活性的融合蛋白Fab/IFN-aA。结论 融合蛋白Fab/IFN-aA的成功构建及在大肠杆菌的表达,为融合蛋白的纯化及研制新一代乙型肝炎生物导向治疗的基因工程多肽类药物打下了基础。
THE CONSTRUCTION AND EXPRESSION OF A FUSION PROTEIN CONSISTING OF ANTI-HBSAG ANTIBODY FRAGMENT FAB AND INTERFERON-aA IN E.COLI Zheng Wei, Tan Hua, Song Shaobai, et al. Department of General Surgery, General Hospital of PLA, Beijing 100853
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