潘晓明 章卫平 吴宗贵 曹雪涛 潘晓明(上海第二军医大学附属长征医院心内科，200003 )；章卫平(第二军医大学免疫学教研室)；吴宗贵(上海第二军医大学附属长征医院心内科，200003 )；曹雪涛(第二军医大学免疫学教研室) 中华肿瘤杂志 2000 0 22 2


    关键词：p27kip1基因；腺病毒；细胞周期；基因转移；蛋白表达 期刊 zhzlzz 0 120-123 基础研究 fur -->


    

【摘要 】 目的 研究外源性p27kip1基因对细胞周期及细胞增殖的影响。方法 构建CMV启动子转录调控的含人p27kip1 cDNA的E1区替代的腺病毒载体pAxlcw .CIhp27kip1，与经 EcoT221酶切的Ad5腺病毒DNA-末端肽复合物共转染293细胞，制备p27kip1 重组腺病毒，在体外转染HeLa细胞，Western blot、FACS及MTT检测分析外源性p27kip1蛋白在细胞内的表达，以及对细胞周期及细胞增殖的影响。结果 获得含人p27kip1 cDNA的重组腺病毒，滴度为1.7×10⁹ pfu/ml。体外转染HeLa细胞24 h后，p27kip1蛋白在p27kip1转染后的HeLa细胞中高表达；FACS检测表明，p27kip1和LacZ重组腺病毒转染后的HeLa细胞，经10%血清刺激后处于G₁ 期的细胞分别为89.93%和59.84%；MTT法检测表明，人p27kip1重组腺病毒转染后的HeLa细胞经20%血清刺激后，48及72 h的A值均低于LacZ重组腺病毒转染后的HeLa细胞(P<0.01) ......