血管形成抑制因子HIAF-1的克隆及其抗肿瘤作用
血管形成抑制因子-1|肿瘤血管形成|基因克隆|肿瘤转移,关键词:
关键词:血管形成抑制因子-1;肿瘤血管形成;基因克隆;肿瘤转移
【摘要 】 目的 克隆和表达一种新的血管形成抑制因子,并研究其抗肿瘤活性。方法 应用逆转录聚合酶链反应从人胎儿肝脏组织中克隆到一种新的血管形成抑制因子(human inhibiting angiogenesis factor-1,HIAF-1),经测序后克隆到表达载体pET30a(+)上,在E.coli BL21∶DE3菌中表达。用MTT法体外检测HIAF-1对内皮细胞的作用,采用小鼠乳癌自发性肺转移模型IVTA2 MA-891,体内研究重组蛋白对肿瘤血管形成的作用和抑瘤作用。结果 从胎儿肝脏组织中首次克隆到人源血管形成抑制因子HIAF-1,经测序为人胶原ⅩⅧ C-末端的一部分。在E.coli细胞中高效表达了该因子的重组蛋白,蛋白表达量为88 mg/L。体外实验表明HIAF-1能抑制内皮细胞的增殖,IC50 值为7.5 μg/ml。动物实验表明该重组蛋白能够显著抑制肿瘤血管形成 ......
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