VEGF受体KDR胞外Ⅴ~Ⅶ区的克隆、单抗制备及KDR在不同来源肿瘤组织中的表达
血管内皮生长因子受体|分子克隆|抗体,单克隆,关键词:,材料与方法,结果,讨论,参考文献
关键词:血管内皮生长因子受体;分子克隆;抗体,单克隆
【摘要】 目的 利用制备的血管内皮细胞增殖因子(VEGF)受体KDR抗体,通过免疫组化,检测KDR在不同来源肿瘤组织中的表达,为探讨VEGF及其受体对肿瘤生长及转移的作用提供可能。方法 采用RT-PCR方法,从人胎儿脐静脉内皮细胞克隆KDR胞外Ⅴ~Ⅶ区基因片段,在大肠杆菌中表达,并用传统的杂交瘤融合技术制备小鼠KDR单克隆抗体。通过组化及Western-blot鉴定KDR单抗的特异性,最后采用S-P免疫组化法,分别对不同来源的115例肿瘤组织及相应正常组织进行了KDR表达分析。结果 不同来源的肿瘤组织中,KDR受体的表达率及强度存在差异,移行上皮来源的膀胱癌100%表达KDR,表达强度最高;乳腺癌及肠道腺癌细胞表达KDR次之;肺鳞癌表达最弱。此外,肿瘤组织中不仅血管内皮细胞表达KDR受体,且肿瘤细胞、血管平滑肌细胞及某些间质细胞也有KDR表达,而相应正常组织中KDR表达相对较弱。结论 VEGF受体KDR不仅表达于肿瘤血管内皮细胞,而且表达于肿瘤细胞,肿瘤细胞表达KDR的强度与组织来源有关。
Cloning and monoclonal antibody preparation of VEGF receptor KDRextracellular Ⅴ~Ⅶ domain and KDR expression in carcinomas of different origins SONG Shumei, ZENG Li, WU Jian, et al. Beijing Institute for Cancer Research, Beijing MedicalUniversity, Beijing 100034
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