新生mRNA分析方法的建立与初步应用
RNA|信使|RNA聚合酶类|细胞核,关键词:
关键词:RNA;信使;RNA聚合酶类;细胞核
【摘要】 目的 在转录水平上分析某种信号引起细胞特定基因表达改变的量效关系。方法 采用SKO007 细胞,逐一对无损细胞核的制备、新生转录反应和[α-32 P]标记新生mRNA的提取等关键步骤进行了方法学研究,并对我室研究白细胞介素(IL)-6信号转导机制的常用细胞系IL-6、IL-6受体(R)α、IL-6Rβ的表达进行了鉴定。结果 1×105 细胞即可得到阳性杂交信号,细胞数在5×105 ~1×107 范围内,其杂交信号随细胞数的增加而增强,线性及重复性满意。常用细胞系除Molt4 外,均有不同程度的IL-6、IL-6Rα和IL-6Rβ表达。结论 所建立的方法在受试细胞数仅为国外报道的十分之一时即可完成操作,且操作相对简单,易为人们接受。
The nuclear runoff transcription assay and its initial application WULijuan* , LI Yan, NI Changyuan, et al. * Daping Hospital, ThirdMilitary Medical University, Chongqing 400042
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