如何正确使用聚合酶链反应技术
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聚合酶链反应(polymerase chainreaction,简称PCR)又称体外酶促基因扩增。它以敏感,特异,快速的核酸分析技术而著称,是分子生物学技术的一项突破。由Mullis发明于1983年。经不断的改进,现今已发展出了不对称PCR(aeymmetri′cPCR),反向PCR(inveree PCR),多重PCR(multipex PCR),锚定PCR(anchoredPCR),差异显示PCR(olol PCR),定量PCR(quantity PCR)等多种PCR技术。
一、PCR的基本原理
PCR模拟于DNA的自然复制过程,引物按照碱基配对与DNA模板互补结合以后,在DNA多聚酶的作用下,按照碱基配对的原则(A、T,C、G),从引物开始合成与模板DNA互补的DNA链。经变性,退火,延伸等一次循环,DNA链数量增加一倍。
二、PCR步骤的要点
1.高温变性:双链DNA模板在热作用下(一般在95℃),使氢链断裂,双链解离,形成单链DNA这一过程称之为变性。变性后的单链可以重新结合 ......
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