何谓实时荧光聚合酶链反应定量检测?
关键词:
问:何谓实时荧光聚合酶链反应定量检测?
答: 在普通PCR扩增系统中,加入一个与靶基因序列特异互补的双荧光标记探针。5′端标记荧光发射集团,3′端标记荧光淬灭集团,当探针完整时,后者抑制前者而不发光。有靶基因存在时,在PCR复性阶段,探针与靶基因互补,PCR延伸中,由于Taq酶有5′-3′的外切酶活性,引物沿模板延伸至标记探针结合处,将5′端报告集团切下,产生荧光,其强度与PCR产物量成正比关系。荧光光谱分析仪可测得定量结果,它可反应原始模板定量。