【摘要】 目的 建立特异敏感的快速检测贝氏柯克斯体的分子生物学方法。方法 采用巢式聚合酶链反应 (PCR) 方法，进行实验室模拟检测。结果 以贝氏柯克斯体com1基因(编码27000蛋白)为靶标设计了2对引物；该引物特异性实验表明仅贝氏柯克斯体特异性片段可以扩增出来，其余相关立克次体均扩不出；敏感性测试结果可检测出1.5fg的贝氏柯克斯体DNA，可检测出0.001个鸡胚半数致死量(CELD₅₀ )的立克次体；以10000个CELD₅₀ 立克次体感染小鼠时，可于24 h在脾脏中检测出贝氏柯克斯体，检出率为83.3%；对人工模拟的灭菌牛奶、小鼠脏器研磨液、蜱组织研磨液、小鼠血液标本检测发现该法在牛奶和血液标本中的检测敏感性下降3～4个滴度。结论 巢式PCR是快速检验贝氏柯克斯体的敏感特异的方法 ......