辅助性T淋巴细胞(Th)根据其所分泌的细胞因子和功能,至少可分为Th1和Th2细胞亚群。酶联免疫斑点法和流式细胞术是在单个细胞水平上测定Th1和Th2细胞频率的典型方法。我们以外周血单个核细胞(PBMC)中γ干扰素(γIFN)细胞和白细胞介素(IL)-4细胞分别代表Th1和Th2型细胞,采用流式细胞术检测,并与本室已建立的免疫组化染色法[1] 进行比较。
一、材料和方法
1.样品来源:取本室健康职工志愿者9名的外周血,男5例,女4例。
2.主要试剂:小鼠抗人γIFN和IL-4单克隆抗体购自美国R&D公司;生物素-链卵白素碱性磷酸酶显色试剂盒购自美国Lab Vision公司;羊抗鼠IgG-异硫氰酸荧光素、皂素、莫能菌素、依诺霉素、佛波醇酯(PMA)均购自Sigma 公司;RPMI-1640培养基购自GIBCO公司 ......
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