反向聚合酶链反应扩增吉兰巴蕾综合征患者T细胞受体β链基因
神经根炎 聚合酶链反应 受体,抗原,T细胞,关键词:
关键词:神经根炎 聚合酶链反应 受体,抗原,T细胞
【摘要 】 目的 通过研究急性吉兰巴蕾(格林巴利)综合征患者外周血T淋巴细胞受体(TCR)-β链基因的重排情况,以进一步对其基因扩增产物进行序列分析。方法 分离6例患者外周血T淋巴细胞,用异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取细胞总RNA。合成双链cDNA,用T4 DNA聚合酶补平末端,在T4 DNA连接酶的作用下进行环化。环化的DNA直接用作反向聚合酶链反应(IPCR)的模板。扩增产物在1.8%的琼脂糖凝胶上进行电泳分离,溴化乙锭染色。结果 对每份患者标本均可以较好地扩增出重排的TCR-β链基因,而正常人组则未能扩增出任何产物。在反应中连接体系的cDNA浓度对IPCR的影响较大,过高的cDNA浓度使有效的自身环化降低,而导致扩增效率的下降。结论 用IPCR技术可以特异地扩增重排的未知的TCR-β链基因,该方法具有特异性高,易于操作的优点。
Inverse polymerase chain reaction amplification of T cell receptor β -chain genes.
WANG Lijun* , ZHONG Yanfeng, KANG Dexuan, et al.
* Department of Neurology ......
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