【摘要】 目的 通过结核分支杆菌38000蛋白质抗原编码基因在大肠杆菌中稳定表达，以获得大量纯化的38000蛋白质抗原，进而研究其免疫学特性。方法 采用DNA重组技术构建结核分支杆菌38000蛋白质抗原表达载体，双酶切和聚合酶链反应(PCR)鉴定转化子，阳性重组子转化大肠杆菌，并诱导表达外源蛋白；十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法鉴定38000蛋白质抗原在大肠杆菌中的表达；对染色的凝胶扫描，以测定目的蛋白质表达水平。诱导的工程菌抽提包涵体，以确定38000蛋白质抗原在大肠杆菌中的表达形式。结果 菌体蛋白经SDS-PAGE，含阳性重组质粒的菌体蛋白中出现一条新蛋白带，表达量占菌体总蛋白的36%～40%。肺结核患者的血清和结核分支杆菌免疫的羊血清与重组38000蛋白质均呈阳性反应。38 000蛋白质抗原在大肠杆菌中表达方式主要以包涵体形式。结论 构建的大肠杆菌重组体能高效表达结核分支杆菌38000蛋白质抗原，包涵体的表达形式有利于蛋白质纯化和蛋白质稳定，蛋白质必须经过正确折叠才具有生物学活性。

    The 38 000 protein of Mycobacterium tuberculosis is overexpressed in Escherichiacoli HE Xiuyun^* , ZHUANG Yuhui, ZHANG Xiaogang, et al. ^* TuberculosisResearch Laboratory, The 309th Hospital of PLA, Beijing 100091

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