大鼠哮喘模型气道蛋白激酶C表达的研究
关键词:
观察大鼠哮喘模型气道蛋白激酶C(PKC)表达的变化,为探讨PKC在哮喘发病机制中的作用提供实验资料。
材料与方法 (1)大鼠哮喘模型的建立:参照吕国平等[1] 报道的方法,哮喘组大鼠每只腹腔内注射抗原液1m1致敏,2周后用超声雾化喷雾1%鸡卵清蛋白(OVA)让大鼠吸入20分钟激发哮喘,对照组腹腔内注射0.9%生理盐水1m1。(2)分组:SD雄性大鼠(同济医科大学实验动物中心提供)28只,体重150~250g,随机分为4组,每组7只。A组(正常对照组):喷雾生理盐水20分钟,每日1次,共2周。B组(即刻激发组):喷雾1%OVA让大鼠吸入20分钟激发哮喘。C组(哮喘发作1周组):喷雾1% OVA 20分钟,每日1次,共1周。D组(哮喘发作2周组):喷雾1%OVA 20分钟,每日1次,共2周。(3)组织标本制作:于实验的第14日(B组)、21日(C组)、28日(D组)经1%OVA喷雾20分钟激发后,按李荣等[2] 方法测定肺功能,包括潮气量(VT ),气道阻力(Raw)。A组于实验的第28日经0.9%生理盐水喷雾20分钟后测肺功能。随即经气管插管取支气管肺泡灌洗液(BALF)作细胞学分类。开胸取右肺中叶及气管条10mm,部分常规病埋切片,余部分10%福尔马林固定,石蜡包埋切片,用于链霉亲合素-生物素(SP)法。(4)免疫组织化学染色:选用免疫组织化学染色SP法,抗体选用美国Sigma公司兔抗PKCα、PKC β1 (1∶10) ......
您现在查看是摘要页,全文长 11073 字符。