结核分支杆菌rpoB基因克隆与酶谱分析
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关键词：分支杆菌，结核 rpoB基因 克隆
【摘要】 目的 克隆结核分支杆菌rpoB基因。方法 以结核分支杆菌rpoB基因保守
区的聚合酶链反应(PCR)扩增片段为探针从已建立的结核分支杆菌基因文库中筛选rpoB基因。
结果 引物TR1、TR2b扩增H37 Ra DNA获1约411 bp片段。经克隆及序列分析表明该片段
与结核分支杆菌rpoB基因中央区域的序列同源。对约12 000个克隆进行筛选，共获7个可疑
阳性克隆，经过再次杂交证实其中3个克隆为阳性。其中1个克隆携带约3.8 kb插入片段。一
系列内切酶酶切分析后得出该3.8 kb克隆片段的部分限制性内切酶酶谱。进一步分析表明所
用411 bp探针同源序列距两端分别为1 kb和2.8 kb。结论 与报道的结核分支杆菌rpoB基
因开放阅读框架比较，我们克隆的3.8 kb片段包含结核分支杆菌rpoB完整基因的大部分，为
进一步研究利福平及其它利福霉素类药物抗结核作用方式及耐药机制奠定了基础。
Cloning and mapping of the rpoB gene in M. tuberculosis Cheng Shaoji,
Yan Biya, Ma Yu, et al. Beijing Tuberculosis & Thoracic Tumor Research Institute, Beijing 101149
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