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编号:10656134
聚合酶链反应在血行播散型肺结核诊断中的应用
http://www.100md.com 《中华结核和呼吸感染》 1998年第8期
     杨渝浩 董德琼 肖瑜 杨朔 563003 贵州省遵义医学院附属医院呼吸内科(杨渝浩、董德琼),检验中心(肖瑜),临床医学系(杨朔) 中华结核和呼吸感染 1998 8 21 8


    关键词: 期刊 zhjhhhxgr 0 论著摘要 fur -->


    

对32例血行播散型肺结核、40例浸润型肺结核及30例非肺结核患者的静脉血标本,应用聚合酶链反应(PCR)技术检测结核分支杆菌DNA,并与镜检和培养法比较。

    对象 血行播散型肺结核组:32例,合并结核性脑膜炎9例,脊柱结核5例,结核性胸膜炎4例,喉结核3例,肠结核、肾结核各2例,子宫结核1例。浸润型肺结核组:40例,均为活动期。非结核组:30例,其中伤寒12例,肺炎10例,急性肾盂肾炎、败血症各4例。均为我院住院及门诊患者,根据病史、临床表现、X线检查、细菌学及病理组织学等实验室检查,或抗结核治疗有效而确诊。

    方法 (1)标本搜集:所有患者均在未治疗前,分别采集两次静脉血2 ml(抗凝)标本,留晨痰,所有标本置无菌管中送检。(2)试剂及仪器:结核分支杆菌PCR诊断试剂盒及PCR扩增仪由华美生物工程公司提供。(3)方法:①PCR检测:处理标本,取2 ml抗凝血标本低速离心20分钟,取中层白细胞液加1 ml无菌双蒸水振荡混匀,12 000 r/min离心3分钟,倾去上清液,重复以上步骤。取沉淀加入细胞裂解液40μl提取DNA。PCR扩增时间和扩增温度控制,严格按照说明书进行。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳分析,紫外线透射仪观察,结果见245bp扩增带即为阳性,每次均设阴、阳性对照。②涂片作萋-尼抗酸染色镜检 ......


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