子宫内膜异位症候选基因微卫星D9S161、D22S274杂合性丢失的检测
关键词:
子宫内膜异位症(内异症)是妇科的常见病和难以治疗的疾病之一。近年来,其发生率有上升趋势,内异症候选基因的研究是有关内异症病因研究的热点[1] 。本工作对内异症候选基因的两个染色体位点进行杂合性丢失(lossof heterozysosity, LOH) 检测,现报道如下。
一、材料与方法
1.标本提取:(1) 标本来源及取材:收集本院1998年3月至1999年3月妇科住院内异症患者46例,作为观察组。随机选择非子宫病变患者20例,作为对照组。留取经腹腔镜和剖腹手术证实并切除的异位病灶直径0.5~1.0cm,切除子宫者及对照组刮取在位内膜直径0.5~1.0 cm,同时抽取患者静脉血4ml。所有标本立即冻存于-70℃冰箱保存备用。(2) 标本微切及DNA提取:内异症异位病灶组织经石蜡包埋,常规病理切片,镜下寻找残留子宫内膜腺体和间质细胞部位,并标记。观察组46例异位病灶中存在残留异位内膜者为22例,可供试验选用,相应蜡块再连续切片6张(厚15μm),二甲苯脱蜡、95%乙醇水化。用手术刀片刮下标记部位的组织,集中于同一离心管待用。对微切异位病灶组织、子宫内膜及静脉血,按酚/氯仿抽提法提取DNA[2] 。置4℃保存。
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