药代动力学研究用蛋白质多肽药物的放射性标记、分离纯化和鉴定
关键词:,材料与方法,结果与讨论,图2,参考文献,(收稿:1997-02-21修回:1997-07-13)
关键词:
为保证药代动力学研究的可靠性,要求标记蛋白质多肽的放化纯度>95%,保持标记多肽的生物活性和高比活度。为此,笔者重点研究了标记蛋白质多肽分离纯化方法,标记混合物中杂质的来源、性质和鉴定纯度方法的选择及检定生物活性的重要性。
材料与方法
一、材料
基因重组人肿瘤坏死因子α衍生物 (rhTNFα Da,温州复旦生物工程有限公司 -复旦大学遗传研究所 ),重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG-GSF)、基因重组白细胞介素 2(rhIL-2)、基因重组白细胞介素 6(rhIL-6)和小鼠神经生长因子 (mNGF,军事医学科学院放射医学研究所、生物工程技术研究所和基础医学研究所 ),125 I-mNGF(协和医科大学 );基因重组粒巨噬细胞集落刺激因子 -白细胞介素 3(rhGMCSF-IL-3)融合蛋白 (汕头舵滨化学药业总公司 )。 Na125 I(Amersham);Iodogen(军事医学科学院毒物药物研究所 );Sephacryl S200 HR、 Sephadex G-25和 G-75(Pharmacia);色谱纯乙腈。 HP1100高效液相色谱仪 ;色谱柱 ;Dragon DeneyWellscan MK2酶标仪 ;Wallac1470 Wizard型γ计数仪 ;RPMI-1640(GIBICO);小牛血清 (北京军区军马防治检验所 );7TD1细胞 (北京医科大学免疫教研室引进 );MTT(Fluka);L929细胞株 (中国药品生物制品检定所引进 ) ......
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