125I-VIP的制备及其与SGC7901人胃腺癌细胞受体体外结合特性研究
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关键词:血管活性肠肽;碘放射性同位素;同位素标记;受体;胃肿瘤
【摘要】 目的 探讨高比活度125 I-血管活性肠肽(VIP)的制备及其与人SGC7901胃腺癌细胞受体体外结合特性。 方法 125 I-VIP采用氯胺-T法标记,Sephadex G-50柱层析分离纯化,硅胶60F254 薄板层析检测。125 I-VIP与SGC7901细胞进行体外时间-温度结合实验、可逆结合实验、饱和结合实验和竞争结合实验,通过125 I-UdR参入实验与cAMP生成实验评价VIP对SGC7901细胞的生物效应。 结果 125 I标记率为73.8%,125 I-VIP比活度为18.2TBq/mmol,放射化学纯度(RCP)
为98.2%,-80℃贮存48天后RCP仍有96.3%;125 I-VIP与SGC 7901细胞结合具有温度与时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异性,Scatchard作图提示SGC 7901细胞含有高低亲和力两种VIP受体,Kd分别为0.230与2.788nmol/L, Bmax 为0.120与5.607pmol/106 细胞;VIP以剂量依赖方式促进SGC7901细胞cAMP产生和DNA的合成 ......
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