关键词:B7-1;协同刺激分子;单克隆抗体;恶性淋巴瘤
摘 要 目的: 制备鼠抗人B7-1分子的功能性单克隆抗体,研究其对高表达相应配基分子细胞的生物学效应。方法: 用两株转人B7-1基因细胞株XG7-B7和L-B7分别作为免疫原及检测细胞株,利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。以快速定性试纸分析法鉴定单抗所属的小鼠IgG亚类,采用竞争抑制及间接免疫荧光法分析单抗的特异性和亲和力,以高表达B7-1分子的恶性淋巴瘤细胞Raji和Daudi为靶细胞,分析单抗对其生长的影响。以人多发性骨髓瘤细胞转入B7-1基因细胞株XG1-B7为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBLs)为反应细胞,用MTT法分析单抗的中和活性。结果: 成功地获得了1株鼠抗人B7-1的功能性单克隆抗体(克隆4E5), 属于小鼠IgG1亚类,经流式细胞仪分析,4E5与PBLs、体外人工诱导的树突状细胞(DCs)、Raji和Daudi的阳性结合率分别为10.2%、95.1%、92.7%及89.2%;能完全阻断标准抗人B7-1单抗与相应抗原的结合。同时还发现,单抗4E5能显著地抑制恶性淋巴瘤细胞Raji和Daudi的生长繁殖,并能阻断B7分子介导的协同刺激信号的传导。结论: 单克隆抗体4E5是一株抗人B7-1分子的功能性单抗,具有重要的研究和应用价值。
中国图书分类号 R392.11
Preparation of functional monoclonal antibody against h uman CD80(B7-1) and analysis of its biological effects
QIU Yu-Hua,JI Yu-Hong,GUO Ling et al.
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