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编号:10660226
汉滩病毒截短核蛋白在大肠杆菌中表达及其抗原分析*
http://www.100md.com 《中国人兽共患病杂志》 1999年第6期
肾综合征出血热病毒|重组核蛋白|免疫印迹试验|间接酶联免疫|吸附试验,汉滩病毒截短核蛋白在大肠杆菌中表达及其抗原分析*,关键词:
     王长军 唐家琪 潘秀珍 操 敏 李先富 郭恒彬 南京军区军事医学研究所流行病室(南京,210002) 中国人兽共患病杂志 1999 0 15 6


    关键词:肾综合征出血热病毒;重组核蛋白;免疫印迹试验;间接酶联免疫;吸附试验 期刊 zgrsghbzz 0 实验研究 fur -->


    

摘要 目的 体外克隆表达肾综合征出血热病毒部分核蛋白编码基因,筛选病毒核蛋白在人体体液应答中的主要抗原决定簇区,以期获得高质量核蛋白抗原,为研制新型HFRS基因工程诊断试剂奠定基础。

    方法 利用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶酶切的方法分离汉滩病毒76-118S片段部分编码基因(SA、SB和SC),并分别克隆入T7原核表达载体,在大肠杆菌中表达;免疫印迹试验和酶联免疫吸附反应分析重组抗原活性。

    结果 截短核蛋白得到有效表达,分子量分别约为4.5KD(rSA)、25kD(rSB)和15.5kD(rSC),Western-blot分析表明25kD截短核蛋白具有较好的抗原活性;粗提抗原Dot-ELISA方法检测HFRS患者血清结果与IFA法一致;25kD重组小片段抗原与抗HFRSV单克隆抗体5H5、B11及H7可发生特异性反应。

    结论 汉滩病毒核蛋白的主要抗原决定簇主要集中在氨基端;原核表达的截短核蛋白在HFRSV感染的血清学诊断中具有一定的价值。

EXPRESSION OF TRUNCATED REGIONS OF THE SGENOME SEGMENT OF HANTAAN VIRUS INE.COLI AND THE ANTIGEN OF THE RECOMB INANT PROTEINS

Wang Changjun TangJiaqi Pan Xiuzheng et al

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